Xylazin
C12H16N2S 220,34
4H-1,3-Thiazin-2-amin, N-(2,6-Dimethylphenyl)-5,6-Dihydro-.
5,6-Dihydro-2-(2,6-xylidino)-4H-1,3-thiazin [7361-61-7].
» Xylazin enthält nicht weniger als 98,0 Prozent und nicht mehr als 102,0 Prozent C12H16N2S.
Verpackung und Lagerung- In dichten Behältern aufbewahren. Ab 25 Uhr einkaufen, Ausflüge zwischen 15 und 30 Uhr erlaubt.
Beschriftung- Wenn es nur für veterinärmedizinische Zwecke bestimmt ist, ist dies auf dem Etikett angegeben.
USP-Referenzstandards<11>
USP Xylazin RS
Identifikation-
A: Infrarotabsorption<197K>.
B: Ultraviolette Absorption<197U>-
Lösung: 5 µg pro ml.
Medium: 0,1 N Salzsäure.
C: Dünnschichtchromatographischer Identifizierungstest<201>-
Testlösung: 2 mg pro ml, in Chloroform.
Entwickelndes Lösungsmittelsystem: Aceton, Chloroform und Methanol (2:1:1).
Vorgehensweise- Trocknen Sie die Platte vor dem Auftragen der Testlösung und der Standardlösung mindestens 30 Minuten lang bei 105 °C und lassen Sie sie in einem Exsikkator abkühlen. Lassen Sie die Applikationen mit Hilfe eines warmen Luftstroms trocknen und entwickeln. Unter kurzwelligem UV-Licht untersuchen: Größe, Intensität und RF-Wert des aus der Testlösung erhaltenen Hauptflecks entsprechen denen des aus der Standardlösung erhaltenen Hauptflecks.
Schmelzbereich<741>: zwischen 136 und 142.
Trocknungsverlust<731>- Trocknen Sie es 4 Stunden lang im Vakuum bei 60 °C: Es verliert nicht mehr als 0,5 % seines Gewichts.
Glührückstand<281>: nicht mehr als 0,1 %.
Schwermetalle, Methode II<231>: 20 µg pro g.
Grenzwert von 3-Amino-1-Propanol- Bereiten Sie eine Testlösung von Xylazin in Methanol mit 100 mg pro ml vor und verwenden Sie Ultraschall, um eine Auflösung zu erreichen. Bereiten Sie eine Standardlösung von 3-Amino-1-Propanol in Methanol mit 0,5 mg pro ml vor. Tragen Sie 5 µL der Testlösung und der Standardlösung getrennt auf eine Dünnschichtchromatographieplatte (siehe Chromatographie<621>) auf, die mit einer 0,25 mm dicken Schicht chromatographischem Kieselgel beschichtet ist. Lassen Sie die Anwendungen trocknen und entwickeln Sie die Chromatogramme in einer gesättigten Chromatographiekammer, die ein Lösungsmittelsystem bestehend aus einer Mischung aus Alkohol und Ammoniumhydroxid (80:20) enthält, bis sich die Lösungsmittelfront etwa drei Viertel der Länge der Platte bewegt hat. Nehmen Sie die Platte aus der Chromatographiekammer, markieren Sie die Lösungsmittelfront und trocknen Sie die Platte an der Luft. Besprühen Sie die Platte mit einer alkoholischen Lösung von Ninhydrin (1 zu 500) und erhitzen Sie die Platte sofort in einem Ofen bei 105 °C. Wenn die Flecken sichtbar sind, nehmen Sie die Platte aus dem Ofen und lassen Sie sie abkühlen. Untersuchen Sie die Chromatogramme und vergleichen Sie die Intensitäten der Flecken, die 3-Amino-1-Propanol entsprechen: Die Intensität des aus der Testlösung erhaltenen Flecks für 3-Amino-1-Propanol ist nicht größer als die des aus der Standardlösung (0,5 %) erhaltenen Flecks für 3-Amino-1-Propanol.
Grenzwert für Aceton und Isopropylalkohol-
Verdünnungsmittel- 15 ml Eisessig mit Wasser auf 1000 ml verdünnen und mischen.
Standardlösung- Übertragen Sie jeweils 10,0 µL Aceton und Isopropylalkohol in einen 500-ml-Meßkolben, verdünnen Sie mit Verdünnungsmittel auf das Volumen und mischen Sie. Diese Lösung enthält 15,8 µg Aceton pro ml und 15,7 µg Isopropylalkohol pro ml.
Testlösung- Übertragen Sie etwa 100 mg Xylazin, genau abgewogen, in einen 10-ml-Messkolben, lösen Sie es auf, verdünnen Sie es mit Verdünnungsmittel auf das Volumen und mischen Sie.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)- Der Gaschromatograph ist mit einem Flammenionisationsdetektor und einer 2 mm × 1,8 m großen Säule ausgestattet, die mit 0,1 % Phase G25 auf 80 μm gefüllt ist bis 100-mesh unterstützen S7. Als Trägergas wird Helium mit einer Durchflussrate von etwa 30 ml pro Minute verwendet. Die Temperaturen der Einspritzöffnung und des Detektors werden bei etwa 240 bzw. 275 gehalten. Die Programmierung des Systems erfolgt nach den folgenden Schritten. Die Säulentemperatur wird nach jeder Injektion 6 Minuten lang bei 30 °C gehalten, dann mit einer Geschwindigkeit von 10 °C pro Minute auf 100 °C erhöht, dann mit einer Geschwindigkeit von 15 °C pro Minute weiter auf 220 °C erhöht und 10 Minuten lang beibehalten. Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen wie für das Verfahren angegeben auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,75 für Aceton und 1,0 für Isopropylalkohol; die Auflösung R zwischen Aceton und Isopropylalkohol beträgt nicht weniger als 2,0; der aus jedem Analytpeak bestimmte Tailing-Faktor beträgt nicht mehr als 2,0; und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 2,0 %.
Vorgehensweise- Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 2 µL) der Standardlösung und der Testlösung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen für die Hauptpeaks. Berechnen Sie die prozentualen Anteile von Aceton und Isopropylalkohol im Xylazin-Anteil anhand der Formel:
(C/W)(rU / rS)
wobei C die Konzentration von Aceton oder Isopropylalkohol in jedem ml der Standardlösung in µg pro ml ist; W ist das Gewicht (in mg) des zur Herstellung der Testlösung verwendeten Xylazins; und rU und rS sind die Antworten für den relevanten Analytpeak, der aus der Testlösung bzw. der Standardlösung erhalten wurde: Es wurden nicht mehr als 0,02 % Aceton und nicht mehr als 0,2 % Isopropylalkohol gefunden.
Chromatographische Reinheit-
Lösung A, Lösung B, mobile Phase und Verdünnungsmittel- Gehen Sie wie im Test beschrieben vor.
Standardlösung- Verdünnen Sie ein genau abgemessenes Volumen der im Assay hergestellten Standardzubereitung quantitativ mit Verdünnungsmittel, um eine Lösung mit einer Konzentration von 0,008 mg USP Xylazin RS pro ml zu erhalten.
Testlösung- Übertragen Sie etwa 100 mg genau abgewogenes Xylazin in einen 10-ml-Messkolben, geben Sie 5,0 ml Lösung B hinzu und rühren Sie, bis es sich auflöst. Etwa 4 ml Lösung A hinzufügen und schwenken. Mit Lösung A auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)- Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 205-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 25 cm großen Säule ausgestattet, die die Packung L7 und eine Vorsäule enthält. Die Flussrate beträgt etwa 1 ml pro Minute. Äquilibrieren Sie die Säule mit einer mobilen Phase bestehend aus 75 % Lösung A und 25 % Lösung B. Behalten Sie diese Zusammensetzung nach jeder Injektion 8 Minuten lang bei, danach wird der Anteil der Lösung B über einen Zeitraum von 27 Minuten linear von 25 % auf 70 % erhöht und 5 Minuten lang bei dieser Zusammensetzung gehalten; Erhöhen Sie dann vor der nächsten Injektion den Anteil der Lösung A schnell auf 75 %. Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Der Tailing-Faktor beträgt nicht mehr als 1,5; und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 5,0 %.
Vorgehensweise- Injizieren Sie gleiche Volumina (ca. 10 µL) der Standardlösung und der Testlösung getrennt in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen für die Hauptpeaks. Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung im Xylazin anhand der Formel:
1000(C/W)(ri F/rS)
wobei C die Konzentration von USP Xylazin RS in der Standardlösung in mg pro ml ist; W ist das Gewicht (in mg) des zur Herstellung der Testlösung verwendeten Xylazins; ri ist die Reaktion jedes einzelnen Verunreinigungspeaks im Chromatogramm der Testlösung, der im Chromatogramm des Verdünnungsmittels nicht vorhanden ist; F ist der Reaktionsfaktor von 0,72 für den 2,6-Dimethylanilin-Peak bei einer Reaktionszeit von etwa 0,8 relativ zur Retentionszeit von Xylazin, von 0,36 für eine Verunreinigung bei einer relativen Retentionszeit von etwa 1,3, 0,37 für 2,6-Dimethylphenylisothiocyanat bei einer relativen Retentionszeit von etwa 2 und 1,0 für jede andere Verunreinigung; und rS ist die Reaktion des Xylazin-Peaks im Chromatogramm der Standardlösung: Es werden nicht mehr als 0,5 % einer einzelnen Verunreinigung gefunden; und die Summe aller gefundenen Verunreinigungen nicht mehr als 1 % beträgt.
Test-
Lösung A- 3,03 g Natrium-1-heptansulfonat in 800 ml Wasser auflösen, mit 2 N Schwefelsäure einen pH-Wert von 3,0 einstellen, mit Wasser auf 1000 ml verdünnen und mischen. Durch einen Filter mit einer Porosität von 0,5 µm oder feiner passieren lassen.
Lösung B- Verwenden Sie Acetonitril.
Mobile Phase- Verwenden Sie variable Mischungen von Lösung A und Lösung B gemäß den Anweisungen für das chromatographische System.
Verdünnungsmittel- Bereiten Sie eine Mischung aus Lösung A und Lösung B (50:50) vor.
Standardvorbereitung- Bereiten Sie eine Lösung von USP Xylazin RS in Verdünnungsmittel mit einer bekannten Konzentration von etwa 0,4 mg pro ml vor.
Assay-Vorbereitung- Übertragen Sie etwa 10 mg Xylazin genau abgewogen in einen 25-ml-Messkolben, verdünnen Sie es mit Verdünnungsmittel auf das Volumen und mischen Sie.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)- Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 226-nm-Detektor und einer 3,9 mm × 30 cm großen Säule ausgestattet, die die Packung L1 enthält. Die Flussrate beträgt etwa 1 ml pro Minute. Äquilibrieren Sie die Säule mit einer mobilen Phase bestehend aus 70 % Lösung A und 30 % Lösung B. Behalten Sie diese Zusammensetzung nach jeder Injektion 5 Minuten lang bei, danach wird der Anteil der Lösung B über einen Zeitraum von 5 Minuten linear von 30 % auf 40 % erhöht und 5 Minuten lang bei dieser Zusammensetzung gehalten; Erhöhen Sie dann vor der nächsten Injektion den Anteil der Lösung A schnell auf 70 %. Chromatographieren Sie das Standardpräparat und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Der Tailing-Faktor beträgt nicht mehr als 2,0; und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 2,0 %.
Vorgehensweise- Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 10 µL) der Standardzubereitung und der Testzubereitung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen für die Hauptpeaks. Berechnen Sie die Menge (in mg) an C12H16N2S in der Xylazin-Menge anhand der Formel:
25 °C (rU / rS)
wobei C die Konzentration von USP Xylazin RS in der Standardzubereitung in mg pro ml ist; und rU und rS sind die Xylazin-Peak-Reaktionen, die mit der Testvorbereitung bzw. der Standardvorbereitung erhalten wurden.