Melatonin
C13H16N2O2 232,28
N-Acetyl-5-Methoxytryptamin;
N-(2-(5-Methoxy-1H-indol-3-yl)ethyl)acetamid [73-31-4].
DEFINITION
Melatonin enthält NLT 98,5 % und NMT 101,5 % Melatonin (C13H16N2O2), berechnet auf der Trockenbasis.
IDENTIFIZIERUNG
Ändern Sie den Text:
• A. SPEKTROSKOPISCHE IDENTIFIZIERUNGSTESTS<197>, Infrarotspektroskopie: 197K (CN 1-MAI-2020)
Ändern Sie den Text:
• B. SPEKTROSKOPISCHE IDENTIFIZIERUNGSTESTS<197>, Ultraviolett-sichtbare Spektroskopie: 197U (CN 1-MAI-2020)
Analytische Wellenlänge: 277 nm
Probenlösung: 10 µg/ml Melatonin in Isopropylalkohol
Akzeptanzkriterien: Erfüllt die Anforderungen. Die auf Trockenbasis berechneten Absorptionsgrade unterscheiden sich nicht um mehr als 3,0 %.
• C. HPLC-IDENTIFIZIERUNGSTEST
Analyse: Gehen Sie wie im Test beschrieben vor.
Akzeptanzkriterien: Die Retentionszeit des Hauptpeaks der Probenlösung entspricht der der Standardlösung.
TEST
• VERFAHREN
Puffer: 0,5 g/L monobasisches Kaliumphosphat in Wasser. Mit Phosphorsäure einen pH-Wert von 3,5 einstellen und filtrieren.
Mobile Phase: Acetonitril und Puffer (25:75)
Systemeignungslösung: 0,1 mg/ml USP Melatonin RS und 0,02 mg/ml USP Melatonin Related Compound A RS in Mobile
Phase
Standardlösung: 0,1 mg/ml USP Melatonin RS in der mobilen Phase
Probenlösung: 0,1 mg/ml Melatonin in der mobilen Phase
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie<621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 222 nm
Säule: 4,6 mm × 15 cm; 5-µm Packung L1
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße: 10 µL
Systemtauglichkeit
Beispiele: Systemeignungslösung und Standardlösung
[HINWEIS-Die relativen Retentionszeiten für Melatonin-verwandte Verbindung A und Melatonin betragen 0,4 bzw. 1,0.]
Eignungsanforderungen
Auflösung: NLT 4 zwischen Melatonin und Melatonin-verwandter Verbindung A, Systemeignungslösung
Relative Standardabweichung: NMT 2,0 %, Standardlösung
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Melatonin-Prozentsatz in der aufgenommenen Melatonin-Portion:
Ergebnis = (rU /rS ) × (CS /CU ) × 100
rU = Spitzenreaktion der Probenlösung
rS= Spitzenreaktion der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Melatonin RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Melatonin in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien: 98,5-101,5 % auf Trockenbasis
VERUNREINIGUNGEN
• ZÜNDUNGSRÜCKSTÄNDE<281>: NMT 0,1 %
• CHLORID UND SULFAT, Chlorid<221>
Standard: 0,10 ml 0,020 N Salzsäure
Probe: 0,36 g Melatonin
Akzeptanzkriterien: NMT 0,02 %
• VERWANDTE VERBINDUNGEN
Lösung A: Acetonitril
Lösung B: Verwenden Sie Puffer, der wie im Test beschrieben zubereitet wurde.
Mobile Phase: Siehe Tabelle 1.
Tabelle 1
Zeit (Min.) Lösung A (%) Lösung B (%)
0 25 75
7 25 75
15 80 20
18 25 75
25 25 75
Verdünnungsmittel: Mischung aus Lösung A und Lösung B (25:75)
Systemgeeignete Lösung: 0,1 mg/ml USP Melatonin RS und 0,02 mg/ml USP Melatonin Related Compound A RS in Verdünnungsmittel
Standardlösung: 5 µg/ml USP Melatonin RS in Verdünnungsmittel
Probenlösung: 1 mg/ml Melatonin in Verdünnungsmittel
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie<621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 222 nm
Säule: 4,6 mm × 15 cm; 5-µm Packung L1
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße: 10 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
[HINWEIS-Die relativen Retentionszeiten für Melatonin-verwandte Verbindung A und Melatonin betragen 0,4 bzw. 1,0.]
Eignungsanforderungen
Auflösung: NLT 4,0 zwischen Melatonin und Melatonin-verwandter Verbindung A
Relative Standardabweichung: NMT 2,0 % für den Melatonin-Peak
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz jeder einzelnen Verunreinigung in der aufgenommenen Melatoninportion:
Ergebnis = (rU /rS ) × (CS /CU ) × 100
rU = Spitzenreaktion jeder einzelnen Verunreinigung aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion von Melatonin aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Melatonin RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Melatonin in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien
Einzelne Verunreinigungen: NMT 0,1 %
Gesamtverunreinigungen: NMT 1,0 %
SPEZIFISCHE TESTS
• TROCKNUNGSVERLUST<731>
Analyse: Eine Probe 3 Stunden lang bei 80° im Vakuum trocknen.
Akzeptanzkriterien: NMT 1,0 %
ZUSÄTZLICHE ANFORDERUNGEN
• VERPACKUNG UND LAGERUNG: In dichten, lichtgeschützten Behältern aufbewahren.
• USP-REFERENZSTANDARDS<11>
USP Melatonin RS
USP Melatonin-verwandte Verbindung A RS
2-(5-Methoxy-1H-indol-3-yl)ethanamin.
C11H14N2O 190,24