Levetiracetam
C8H14N2O2 170,21
1-Pyrrolidinacetamid, -ethyl-2-oxo-, (S)-;
()-(S)--Ethyl-2-oxo-1-pyrrolidinacetamid [102767-28-2].
DEFINITION
Levetiracetam enthält NLT 98,0 % und NMT 102,0 % C8H14N2O2, berechnet auf wasserfreier und lösungsmittelfreier Basis.
IDENTIFIZIERUNG
• A. Infrarotabsorption<197K>
• B. Die Retentionszeit des Hauptpeaks für Levetiracetam aus der Probenlösung entspricht der des Levetiracetam S-Enantiomers aus der Systemeignungslösung, wie im Test für den Grenzwert von Levetiracetam R-Enantiomer erhalten.
TEST
• Vorgehensweise
Puffer: 2,7 g/L monobasisches Kaliumphosphat in Wasser. Stellen Sie mit 2 %iger wässriger Kaliumhydroxidlösung (Gew./Vol.) einen pH-Wert von 5,5 ein.
Lösung A: Acetonitril und Puffer (1:19)
Lösung B: Acetonitril
Mobile Phase: Siehe die Gradiententabelle unten.
Zeit (Min.) Lösung A (%) Lösung B (%)
0 100 0
3 100 0
20 71 29
Systemgeeignete Lösung: 0,2 mg/ml USP Levetiracetam RS und 0,08 mg/ml USP Levetiracetam-verwandte Verbindung A RS in Lösung A. Zur Vorbereitung zunächst die erforderliche Menge USP Levetiracetam RS in einem geeigneten Messkolben auflösen. 10 % des Kolbenvolumens 0,1 N Kaliumhydroxid hinzufügen. Lassen Sie die Mischung etwa 15 Minuten lang bei Raumtemperatur reagieren und neutralisieren Sie sie dann durch Zugabe von 0,1 N Salzsäure in einer Menge von 10 % des Kolbenvolumens. Geben Sie die erforderliche Menge USP Levetiracetam Related Compound A RS hinzu, beschallen Sie es, um es aufzulösen, verdünnen Sie es mit Lösung A auf das Volumen und mischen Sie.
Standardlösung: 0,1 mg/ml USP Levetiracetam RS in Lösung A
Probenlösung: 0,1 mg/ml Levetiracetam in Lösung A
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie<621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 205 nm
Säule: 4,6 mm × 15 cm; Verpackung L1
Flussrate: 0,9 ml/min
Injektionsgröße: 10 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
[Hinweis-Die relativen Retentionszeiten sind in der Verunreinigungstabelle 1 angegeben.]
Eignungsanforderungen
Relative Standardabweichung: NMT 1,0 %
[Hinweis-Wenn die Systemeignungskriterien nicht erfüllt werden können, wird empfohlen, die Säulentemperatur bei 20 °C zu halten, um das System zu stabilisieren.]
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz von C8H14N2O2 in der eingenommenen Portion Levetiracetam:
Ergebnis = [(rU/rS) × (CS/CU) × 100] F
rU = Spitzenreaktion von Levetiracetam aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion von Levetiracetam aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Levetiracetam RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Levetiracetam in der Probenlösung (mg/ml)
F = Prozentsatz des Levetiracetam R-Enantiomers aus dem Test für den Grenzwert von Levetiracetam R-Enantiomer
Akzeptanzkriterien: 98,0 %-102,0 % auf wasserfreier und lösungsmittelfreier Basis
VERUNREINIGUNGEN
Anorganische Verunreinigungen
• Rückstände bei der Zündung<281>: NMT 0,1 %
• Schwermetalle, Methode II<231>: 20 ppm
Organische Verunreinigungen
• Verfahren 1: Grenzwert der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B
[Hinweis-Führen Sie diesen Test nur durch, wenn Levetiracetam-verwandte Verbindung B eine bekannte Prozessverunreinigung ist.]
Puffer: 1,22 g Natrium-1-decansulfonat in 1 l Wasser mit etwa 1,3 ml Phosphorsäure. Stellen Sie mit 20 % (w/v) Kaliumhydroxid einen pH-Wert von 3,0 ein.
Mobile Phase: Acetonitril und Puffer (3:17)
Systemeignungslösung: 2 mg/ml USP Levetiracetam-verwandte Verbindung B RS in der mobilen Phase
Standardlösung: 0,002 mg/ml der mit USP Levetiracetam verwandten Verbindung B RS in der mobilen Phase
Probenlösung: 2,0 mg/ml Levetiracetam in der mobilen Phase
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie 621, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 200 nm
Säule: 4,6 mm × 25 cm; Verpackung L1
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße
Systemeignung: 10 µL
Analyse: 50 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
[Hinweis-Die Retentionszeit für Levetiracetam-verwandte Verbindung B beträgt 9 Minuten.]
Eignungsanforderungen
Tailing-Faktor: NMT 3,0
[Hinweis-Wenn ein deutlicher Tailing des Levetiracetam-verwandten Verbindung-B-Peaks beobachtet wird (größer als 3,0), wird empfohlen, die Säulentemperatur bei 27 °C zu halten, um das System zu stabilisieren.]
Relative Standardabweichung: NMT 2,0 %
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B in der eingenommenen Portion Levetiracetam:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × (Mr1/Mr2) × 100
rU = Spitzenreaktion der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B aus der Standardlösung
CS = Konzentration der mit USP Levetiracetam verwandten Verbindung B RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Levetiracetam in der Probenlösung (mg/ml)
Mr1 = Molekulargewicht der freien Base der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B, 102,1
Mr2 = Molekulargewicht der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B, 138,6
Akzeptanzkriterien: NMT 0,10 %
[Hinweis-Die gemessene Menge der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B ist in die Gesamtverunreinigungen im Test auf organische Verunreinigungen, Verfahren 2, einzubeziehen.]
• Verfahren 2
Puffer, Lösung A, Lösung B, mobile Phase, Systemeignungslösung und chromatographisches System: Gehen Sie wie im Test beschrieben vor.
Standardlösung: 0,005 mg/ml USP Levetiracetam RS in Lösung A
Probenlösung: 5 mg/ml Levetiracetam in Lösung A
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung in der eingenommenen Portion Levetiracetam:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = Spitzenreaktion jeder Verunreinigung aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion von Levetiracetam aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Levetiracetam RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Levetiracetam in der Probenlösung (mg/ml)
F = relativer Antwortfaktor (siehe Verunreinigungstabelle 1)
[Hinweis-Ignorieren Sie alle Peaks mit einer relativen Retentionszeit von 0,19 oder weniger.]
Akzeptanzkriterien
Einzelne Verunreinigungen: Siehe Verunreinigungstabelle 1.
Gesamtverunreinigungen: NMT 0,4 %
Verunreinigungstabelle 1
Name Relative Retentionszeit Relativer Reaktionsfaktor Akzeptanzkriterien, NMT (%)
Pyridin-2-ol a 0,37 1,0 0,025
Levetiracetamsäureb 0,62 1,2 0,3
Levetiracetam 1,00 - -
Levetiracetam-verwandte Verbindung Ac 1,25 0,35 0,05
Jede einzelne nicht näher bezeichnete Verunreinigung - 1,0 0,05
a Nicht im Gesamtverunreinigungsgrenzwert enthalten.
b (S)-2-(2-Oxopyrrolidin-1-yl)butansäure. Im Gesamtverunreinigungsgrenzwert enthalten.
c (S)-N-(1-Amino-1-Oxobutan-2-yl)-4-Chlorbutanamid. Wird nur dann in den Gesamtverunreinigungsgrenzwert einbezogen, wenn es sich bei der mit Levetiracetam verwandten Verbindung B um eine bekannte Prozessverunreinigung handelt.
SPEZIFISCHE TESTS
• Wasserbestimmung, Methode Ia<921>: NMT 0,5 %
• Grenzwert von Levetiracetam R-Enantiomer
Mobile Phase: n-Hexan und dehydrierter Alkohol (4:1)
Systemeignungslösung: 0,1 mg/ml USP Levetiracetam Racemic Mixture RS in der mobilen Phase
Standardlösung: 0,05 mg/ml USP Levetiracetam RS in der mobilen Phase
Probenlösung: 10 mg/ml Levetiracetam in der mobilen Phase
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie<621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 215 nm
Säule: 4,6 mm × 25 cm; 10µm Packung L51
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße: 20 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
[Hinweis-Die relativen Retentionszeiten für Levetiracetam R-Enantiomer und Levetiracetam S-Enantiomer betragen 0,55 bzw. 1,0.]
Eignungsanforderungen
Auflösung: NLT 4.0 zwischen dem R- und S-Enantiomere
[Hinweis-Wenn ein Auflösungsverlust (weniger als 4,0) beobachtet wird, wird empfohlen, die Säulentemperatur bei 25 °C zu halten, um das System zu stabilisieren.]
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz des Levetiracetam-R-Enantiomers in der eingenommenen Portion Levetiracetam:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = Spitzenreaktion des Levetiracetam-R-Enantiomers aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion von Levetiracetam aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Levetiracetam RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Levetiracetam in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien: NMT 0,8 %
ZUSÄTZLICHE ANFORDERUNGEN
• Verpackung und Lagerung: In gut verschlossenen Behältern aufbewahren und bei Raumtemperatur lagern.
• USP-Referenzstandards<11>
USP Levetiracetam RS
USP Levetiracetam Racemic Mixture RS
Eine 1:1-Mischung aus Levetiracetam S-Enantiomer-(2S)-2-(2-Oxopyrrolidin-1-yl)butanamid und Levetiracetam R-Enantiomer (2R)-2-(2-Oxopyrrolidin-1-yl)butanamid.
USP Levetiracetam-verwandte Verbindung A RS
(S)-N-(1-Amino-1-Oxobutan-2-yl)-4-Chlorbutanamid.
C8H14ClNO3 207,65
USP Levetiracetam-verwandte Verbindung B RS
(S)-2-Aminobutanamidhydrochlorid.
C4H10N2O·HCl 138,6