Lanolin
Lanolin ist die gereinigte, wachsartige Substanz aus der Wolle von Schafen, Ovis aries Linné (Fam. Bovidae), die gereinigt, entfärbt und desodoriert wurde. Es enthält nicht mehr als 0,25 Prozent Wasser. Es darf nicht mehr als 0,02 Prozent eines geeigneten Antioxidans enthalten.
Verpackung und Lagerung- In gut verschlossenen Behältern aufbewahren, vorzugsweise bei kontrollierter Raumtemperatur.
Beschriftung- Auf dem Etikett steht, dass es nicht unverdünnt verwendet werden darf.
USP-Referenzstandards<11>-
USP Lanolin RS
Schmelzbereich, Klasse II<741>: zwischen 38 und 44, bestimmt an einer zuvor auf 8 bis 10 abgekühlten Testprobe.
Säuregehalt<401>-Die freien Säuren in 10,0 g erfordern zur Neutralisation nicht mehr als 2,0 ml 0,10 N Natriumhydroxid.
Alkalität-2,0 g in 10 ml Ether auflösen und 2 Tropfen Phenolphthalein TS hinzufügen: Die Flüssigkeit ist nicht rot gefärbt.
Wasser- Lösen Sie etwa 25 g genau abgewogen in 75 ml eines gemischten Lösungsmittels, bestehend aus 3 Teilen Chloroform und 2 Teilen Methanol, und verdünnen Sie es mit gemischtem Lösungsmittel auf 100,0 ml. Bestimmen Sie den Wassergehalt einer 10,0-ml-Portion wie unter Wasserbestimmung, Methode I<921> beschrieben. Führen Sie eine Blindwertbestimmung mit 10,0 ml gemischtem Lösungsmittel durch und nehmen Sie gegebenenfalls Korrekturen vor. Es werden nicht mehr als 0,25 % gefunden.
Glührückstand<281>: nicht mehr als 0,1 %.
Wasser-lösliche Säuren und Laugen- Erwärmen Sie 10,0 g mit 50 ml Wasser in einem Dampfbad und rühren Sie die Mischung ständig um, bis das Lanolin geschmolzen ist: Beim Abkühlen scheidet sich das Fett vollständig ab und die Wasserschicht bleibt nahezu klar und neutral gegenüber Lackmus. Behalten Sie die Wasserschicht bei.
Wasser-lösliche oxidierbare Stoffe- Eine 10-ml-Portion der Lösung aus dem Test auf wasserlösliche Säuren und Alkalien entfärbt 50 µl 0,10 N Kaliumpermanganat innerhalb von 10 Minuten nicht vollständig.
Chlorid<221>- 20 ml Alkohol mit 1,0 g Lanolin unter einem Rückflusskühler kochen, abkühlen lassen, 1 ml 2 N Salpetersäure hinzufügen, filtrieren und zum Filtrat 5 Tropfen einer Lösung von Silbernitrat in Alkohol (1 zu 50) hinzufügen: Die entstehende Trübung übersteigt nicht die eines Blindwerts, dem 0,50 ml 0,020 N Salzsäure zugesetzt wurden (0,035 %).
Ammoniak- Geben Sie 1 ml 1 N Natriumhydroxid zu einer 10-ml-Portion der Lösung aus dem Test auf wasserlösliche Säuren und Alkalien und kochen Sie: Die Dämpfe verfärben sich nicht zu rotem Lackmusblau.
Jodwert<401>: zwischen 18 und 36, bestimmt an einer Probe von 780 bis 820 mg.
Fremdstoffe- [Anmerkung- Verwenden Sie während dieses Tests pestizidfreie Reagenzien und Lösungsmittel. Referenzmaterialien für Pestizide zur Verwendung in der Standardzubereitung können von jeder kommerziellen Quelle bezogen werden.* ]
Standard-Stammlösungen- Bereiten Sie Stammlösungen in Hexan vor, die jeweils eine bekannte Konzentration von 100 mg Referenzpestizid pro Liter aufweisen. [Hinweis-Konzentrierte Stammlösungen können im Dunkeln in verschlossenen Glasbehältern im Kühlschrank bei 2 bis 5 °C bis zu 1 Jahr lang gelagert werden. Die meisten Pestizide können direkt in Hexan gelöst werden; Allerdings erfordern die Hexachlorcyclohexan-Isomere und die DDT-Gruppe von Pestiziden möglicherweise eine anfängliche Auflösung in der Mindestmenge Aceton, gefolgt von einer Verdünnung mit Hexan auf die angegebene Konzentration.]
Standardvorbereitung- Verdünnen Sie genau abgemessene Volumina der Standard-Stammlösungen quantitativ mit Hexan und kombinieren Sie sie, um ein zusammengesetztes Standardpräparat mit den in Tabelle 1 angegebenen Konzentrationen zu erhalten. Lagern Sie das zusammengesetzte Standardpräparat in einem mit Glas verschlossenen Glasbehälter im Dunkeln bei 2 bis 5 °C und ersetzen Sie es alle zwei Monate. [Hinweis-Bei Bedarf können zwei oder mehr separate zusammengesetzte Standardpräparate hergestellt werden, die jeweils vorzugsweise nicht mehr als 8 Referenzpestizide enthalten. Referenzpestizide sollten für zusammengesetzte Standardpräparate auf der Grundlage ausgewählt werden, dass sich die relativen Retentionszeiten (siehe Tabelle 1) ausreichend unterscheiden, so dass erwartet wird, dass Peaks in Chromatogrammen sich nicht überlappen, und sie sollten entsprechend dem verwendeten chromatographischen System und Detektor ausgewählt und kombiniert werden.]
Gelpermeationschromatographie-Reinigungssystem-
Elutionsmittel - Bereiten Sie eine Mischung aus Methylenchlorid und Hexan (1:1) vor.
Tabelle 1
Standardpräparat (Konzentration in µg pro ml) Relative Retentionszeiten (relativ zu 1,0 für Chlorpyrifos)
Referenzpestizid* Electron- Erfassungsdetektor Flamme- Photometrischer Detektor System I System II
Tetrachlornitrobenzol [TCBN] 0,05 - 0,29 0,24
Alpha-Hexachlorcyclohexan (Alpha-BHC) 0,05 - 0,40 0,35
Beta-Hexachlorcyclohexan (Beta-BHC) 0,30 - 0,43 0,56
Hexachlorbenzol (HCB) 0,05 - 0,45 0,33
Gamma Hexachlorcyclohexan (Lindan) 0,05 - 0,48 0,41
Propetamphos - 0,30 0,48 0,42
Diazinon - 0,20 0,52 0,40
Dichlofenthion 0,10 0,20 0,67 0,56
Ronnel 0,30 0,40 0,81 0,66
Heptachlor 0,10 - 0,83 0,60
Malathion - 0,40 0,91 1,05
Chlorpyrifos 0,30 0,30 1,00 1,00
Aldrin 0,20 - 1,05 0,76
Pirimiphos Ethyl - 0,40 1,14 1,14
Chlorfenvinphos Z 0,40 0,40 1,17 1,40
Heptachlorepoxid 0,20 - 1,29 1,17
Chlorfenvinphos E 0,40 0,50 1,30 1,51
Bromophosethyl 0,40 0,50 1,51 1,45
1,1¢-Dichlor-2-(2-Chlorphenyl)-2-(4-Chlorphenyl)ethen (o,p-DDE) 0,30 - 1,55 1,51
1,1¢-Dichlor-2-(4-Chlorphenyl)-2-(4-Chlorphenyl)ethen (p,p-DDE) 0,30 - 1,88 1,86
Stirophos 0,60 0,80 1,58 1,97
Alpha-Endosulfan 0,40 - 1,63 1,47
1,1¢-Dichlor-2-(2-Chlorphenyl)-2-(4-Chlorphenyl)ethan (o,p-TDE) 0,40 - 1,90 2,19
Dieldrin 0,30 - 1,91 1,84
Endrin 0,40 - 2,13 2,29
Beta-Endosulfan 0,40 - 2,19 2,77
1,1-Dichlor-2,2-Bis(4-chlorphenyl)ethan (p,p-TDE) 0,40 - 2,41 2,87
1,1,1-Trichlor-2-(2-Chlorphenyl)-2-(4-Chlorphenyl)ethan (o,p-DDT) 0,40 - 2,55 2,70
Ethion 1,00 0,40 2,56 3,36
Carbophenothion 0,80 1,00 2,94 3,70
1,1,1-Trichlor-2,2-bix(4-chlorphenyl)ethan (p,p¢-DDT) 0,50 - 3,13 3,50
Methoxychlor 0,60 - 4,70 7,20
Carbophenothionsulfon 5,00 - 5.10 9.20
Carbophenothionsulfoxid 5,00 - 5.40 10.00
* Geeignete Materialien sind entweder bei Chem Service, 660 Tower Lane, P.O. erhältlich. Box 3108, Westchester, PA 19381-3108 oder Greyhound, 88 Grange Road West, Birkenhead, Merseyside, L43 4XF, England U.K.
Gerät-Der Gelpermeationschromatograph ist mit einer 25-mm × 50-cm großen Säule ausgestattet, die mit einer Aufschlämmung von 35 g Styrol/Divinylbenzol-Copolymerkügelchen gefüllt ist, die auf eine Bettlänge von etwa 20 cm komprimiert sind. Das Elutionsmittel wird mit einer Durchflussrate von etwa 5 ml pro Minute und einem Betriebsdruck von 8 bis 11 psi gepumpt. Richten Sie den Chromatographen ein und stellen Sie ihn so ein, dass die Fraktion, die zwischen 0 und 12 Minuten eluiert, verworfen wird. Sammeln Sie die Fraktion, die zwischen 12 und 32 Minuten eluiert, und spülen Sie 2 Minuten lang, wobei Sie die Spülfraktion verwerfen.
Systemeignung-
Elution von Lanolin - Eine geeignete Menge Lanolin schmelzen und durch ein geriffeltes Filterpapier in einen Behälter geben. Übertragen Sie etwa 6,0 g des warmen, filtrierten Lanolins, genau abgewogen, in einen 50-ml-Messkolben. Mit Eluent auf Volumen verdünnen, mischen und filtrieren. Übertragen Sie 5,0 ml dieser Lösung auf die Gelpermeationschromatographiesäule und eluieren Sie mit dem Elutionsmittel. Sammeln Sie 100 ml des Säulenausflusses in tarierten Bechern in 10-ml-Schritten. Verdampfen Sie das Lösungsmittel, kühlen Sie ab, wiegen Sie die Bechergläser und ihren Inhalt und berechnen Sie die Menge an eluiertem Lanolin in jedem 10-ml-Schritt. Die Säule ist geeignet, wenn nicht weniger als 96 % des Lanolins in den ersten 60 ml eluiert.
Elution von Pestiziden aus Lanolin - Lösen Sie geeignete Mengen Diazinon, Diclofenthion, Bromphosethyl, Lindan und Dieldrin in Hexan, um eine Standardlösung mit Konzentrationen von 0,4, 0,4, 1,0, 0,1 bzw. 0,6 µg pro ml zu erhalten. Übertragen Sie 5,0 ml dieser Lösung in einen 10-ml-Messkolben mit 1 g USP Lanolin RS, verdünnen Sie mit Methylenchlorid auf das Volumen und mischen Sie. Übertragen Sie 5 ml dieser Lösung auf die Gelpermeationschromatographiesäule und eluieren Sie mit 160 ml Elutionsmittel. Entsorgen Sie die erste 60-ml-Fraktion und sammeln Sie die nächste 100-ml-Fraktion (von 60 bis 160 ml). Übertragen Sie diese Sammelfraktion in einen Konzentrator mit einem Messkolben, fügen Sie 50 ml Hexan hinzu und konzentrieren Sie durch Eindampfen auf 5 ml. Injizieren Sie etwa 5 µL dieser Fraktion in die unter Chromatografisches System I und Chromatografisches System II beschriebenen Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Höhen der Peaks, die von den fünf Pestiziden in der Standardlösung erhalten werden. Berechnen Sie die Wiederfindungsrate jedes der fünf Pestizide, die in der angereicherten USP Lanolin RS-Lösung verwendet werden. Bereiten Sie eine Testlösung vor, indem Sie Hexan mit der Standardlösung (1:1) mischen. Injizieren Sie 5 µL der Testlösung in die unter Chromatografisches System I und Chromatografisches System II beschriebenen Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Peakhöhen der fünf Pestizide im Chromatogramm der Testlösung. Vergleichen Sie die aus der Fraktion der Standardlösung erhaltenen Peakhöhen mit den Peakhöhen der entsprechenden Pestizide aus der Testlösung: Es werden mindestens 85 % der zugesetzten Mengen jedes der fünf Pestizide zurückgewonnen.
Testvorbereitung-Übertragen Sie etwa 6 g Lanolin, das genau abgewogen und zuvor durch Erhitzen auf einem heißen Wasserbad, falls erforderlich, in eine flüssige Form geschmolzen wurde, in einen 50-ml-Messkolben, lösen Sie es in 25 ml Elutionsmittel auf, verdünnen Sie es mit Elutionsmittel auf das Volumen, mischen Sie und filtrieren Sie. Übertragen Sie 5,0 ml dieser Lösung auf die Säule und eluieren Sie mit 160 ml Elutionsmittel. Entsorgen Sie die erste 60-ml-Fraktion und sammeln Sie die verbleibende Fraktion in einem geeigneten Verdampfer. Durch Eindampfen in einem Dampfbad auf etwa 3 ml aufkonzentrieren, etwa 50 ml Hexan hinzufügen und erneut eindampfen, um alle Spuren von Methylenchlorid zu entfernen, wobei das Volumen mit Hexan auf 3,0 ml eingestellt wird.
Chromatographisches System I (siehe Chromatographie<621>)-Der Gaschromatograph ist mit einem Elektroneneinfangdetektor und einer 0,53 mm × 30 m großen Quarzglas-Kapillarsäule ausgestattet, die mit einer 1,5 μm dicken Schicht der Phase G1 verbunden ist, und einer 0,53 mm × 6 m großen unbeschichteten Quarzglas-Schutzsäule, die mit einem modifizierten Injektorsystem vom Typ einer gepackten Säule verbunden ist. Die Säulentemperatur wird bei 200 gehalten. [Hinweis-Die Anfangstemperatur der Säule kann so eingestellt werden, dass die Retentionszeiten von p,p¢-DDT und Ethion etwa 3,1 bzw. 2,56, relativ zu Chlorpyrifos, betragen.] Helium wird als Trägergas verwendet. Die Flussrate von etwa 25 ml pro Minute wird so eingestellt, dass die Retentionszeit von Chlorpyrifos etwa 4 Minuten beträgt. Die Durchflussrate des Make-up-Gases Stickstoff beträgt etwa 40 Minuten.
Chromatographisches System II-Der Gaschromatograph ist mit einem Flammenphotometriedetektor und einer 0,53 mm × 30 m großen Quarzglas-Kapillarsäule ausgestattet, die mit einer 1,0 μm dicken Schicht der Phase G3 verbunden ist, und einer 0,53 mm × 6 m großen unbeschichteten Quarzglas-Schutzsäule, die an ein modifiziertes Injektorsystem vom Typ einer gepackten Säule angeschlossen ist. Die Säulentemperatur wird bei 200 gehalten. [Hinweis-Die Anfangstemperatur der Säule kann so eingestellt werden, dass die Retentionszeit von Ethion etwa 3,36 im Vergleich zu der von Chlorpyrifos beträgt.] Helium wird als Trägergas mit einer Flussrate von etwa 25 ml pro Minute verwendet, die so eingestellt ist, dass die Retentionszeit von Chlorpyrifos etwa 4 Minuten beträgt. Die Durchflussrate des Make-up-Gases Stickstoff beträgt etwa 40 ml pro Minute. [Hinweis-Bestimmen Sie die Detektorempfindlichkeit für die chromatographischen Systeme I und II: Wählen Sie die Abschwächung des Elektrometers so, dass die Injektion von 1,5 ng Chlorpyrifos auf einem Rekorder oder Drucker-Plotter eine 50 % vollständige Ablenkung erzeugt. Wenn diese Detektorbedingungen außerhalb des linearen Bereichs des Detektors liegen, stellen Sie sich auf den linearen Bereich ein und notieren Sie die Menge an Chlorpyrifos in ng, die unter diesen Bedingungen eine 50 % vollständige Auslenkung erzeugt.]
Verfahren-[Hinweis-Das unten beschriebene Verfahren ist für die Chromatographiesysteme I und II zu befolgen. ] Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 5 µL) der entsprechenden zusammengesetzten Standardzubereitung und der Testzubereitung in den Gaschromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen aller in den Chromatogrammen beobachteten Peaks. Vergleichen Sie die Peakflächen aller Pestizidrückstände im Chromatogramm der Testzubereitung, die von jedem chromatographischen System erhalten wurden, mit denen der Peaks, die den Retentionszeiten im Chromatogramm der entsprechenden zusammengesetzten Standardzubereitung entsprechen, die von jedem der entsprechenden chromatographischen Systeme erhalten wurde. Berechnen Sie die Menge (in ppm) des einzelnen angegebenen Rückstands in der entnommenen Probe anhand der Formel:
30(C / W)(rU / rS)
wobei rU und rS die Peakflächen des Rückstands sind, der in der Testzubereitung und der Standardzubereitung gefunden wurde; jeweils; C ist die Konzentration des Referenzpestizids im Standardpräparat in mg pro Liter. und W ist das Gewicht des entnommenen Lanolins in g: Es werden nicht mehr als 10 ppm eines einzelnen spezifizierten Rückstands gefunden, und die Summe aller gefundenen spezifizierten Rückstände beträgt nicht mehr als 40 ppm.
Petrolatum - Etwa 3 g genau abgewogen im Dampfbad unter häufigem Rühren erhitzen, bis der Gewichtsverlust mindestens dem Wassergehalt entspricht. Kochen Sie 40 ml dehydrierten Alkohol mit 500 mg des so erhaltenen getrockneten Lanolins: Die Lösung ist klar oder nicht mehr als opaleszierend.