L-Histidin (H-His-OH) (CAS: 71-00-1) AJI97-Testmethode
Identifizierung: Vergleichen Sie das Infrarotabsorptionsspektrum der Probe mit dem des Standards mithilfe der Kaliumbromid-Scheibenmethode.
Spezifische Rotation [α]20/D: Getrocknete Probe, C=11, 6 MOL/L HCl
Lösungszustand (Transmission): 0,5 g in 10 ml H2O, auflösen durch Erhitzen im Spektrophotometer, 430 nm, 10 nm Zelldicke.
Chlorid (Cl): 0,7 g, A-1, Ref: 0,40 ml 0,01 mol/L HCl
Sulfat (SO4): 1,2 g, (1), Referenz: 0,50 ml 0,005 mol/L H2SO4
Eisen (Fe): 1,5 g, (1), Referenz: 1,5 ml Eisenstandard. (0,01 mg/ml)
Schwermetalle (Pb): 2,0 g, (1), pH=7, Referenz: 2,0 ml Pb Std. (0,01 mg/ml)
Arsen (As2O3): 2,0 g, (1), Referenz: 2,0 ml As2O3 Std.
Andere Aminosäuren: Testprobe: 50 μg, B-6-a, Kontrolle: L-His 0,25 μg
Trocknungsverlust: 3 Stunden bei 105℃.
Gehalt: Getrocknete Probe, 150 mg (1), 2 ml Ameisensäure, 50 ml Eisessig, 0,1 mol/L HCLO4 1 ml = 15,516 mg C6H9N3O2
pH-Test: 1,0 g in 50 ml H2O)

L-Histidin (H-His-OH) (CAS: 71-00-1) USP36-NF31 Testmethode
DEFINITION
Histidin enthält 98,5 % NLT und 101,5 % NMT von L-Histidin (C6H9N3O2), berechnet auf der Trockenbasis.
IDENTIFIZIERUNG
A. INFRAROT-ABSORPTION<197K>Die Probe und USP L-Histidin RS werden zuvor aus 80 %igem Alkohol umkristallisiert.
TEST
VERFAHREN
Probe: 150 mg Histidin
Leerwert: Mischen Sie 3 ml Ameisensäure und 50 ml Eisessig.
Titrimetrisches System
(Siehe Titrimetrie<541>)
Modus: Direkte Titration
Titriermittel: 0,1 N Perchlorsäure VS
Endpunkterkennung: Potentiometrisch
Analyse: Lösen Sie die Probe in 3 ml Ameisensäure und 50 ml Eisessig auf. Mit dem Titriermittel sehr langsam titrieren. Führen Sie die Blindwertbestimmung durch.
Berechnen Sie den Prozentsatz an Histidin (C 6H9N3O2) in der entnommenen Probe:
Ergebnis = {[(VS-VB) x N x F]/W} x100
VS = von der Probe verbrauchtes Titriermittelvolumen (ml)
VB = vom Leerwert verbrauchtes Titriermittelvolumen (ml)
N = tatsächliche Normalität des Titriermittels (mEq/ml)
F = Äquivalenzfaktor, 155,2 mg/mÄq
W= Probengewicht (mg)
Akzeptanzkriterien: 98,5 % bis 101,5 % auf Trockenbasis
VERUNREINIGUNGEN
RÜCKSTÄNDE BEI DER ZÜNDUNG<281>: NMT 0,4 %
CHLORID UND SULFAT, Chlorid<221>
Standardlösung: 0,50 ml 0,020 N Salzsäure
Probe: 0,73 g Histidin
Akzeptanzkriterien: NMT 0,05 %
CHLORID UND SULFAT, Sulfat<221>
Standardlösung: 0,10 ml 0,020 N Schwefelsäure
Probe: 0,33 g Histidin
Akzeptanzkriterien: NMT 0,03 %
EISEN<241>: NMT 30 ppm
Folgendes löschen:
SCHWERMETALLE, Methode I<231>: NMT 15 ppm
VERWANDTE VERBINDUNGEN
Systemeignungslösung: jeweils 0,4 mg/ml USP L-Histidine RS und USP L-Prolin RS
Standardlösung: 0,05 mg/ml USP L-Histidin RS in Wasser. [HINWEIS-Diese Lösung hat eine Konzentration, die 0,5 % der Probenlösung entspricht.]
Probenlösung: 10 mg/ml Histidin in Wasser
Chromatographisches System (Siehe Chromatographie<621>, Dünnschichtchromatographie.)
Modus: TLC
Adsorptionsmittel: 0,25 mm dicke Schicht einer chromatographischen Kieselgelmischung
Anwendungsvolumen: 5μL
Entwickelndes Lösungsmittelsystem: Butylalkohol, Eisessig und Wasser (3:1:1)
Sprühreagenz: 2 mg/ml Ninhydrin in einer Mischung aus Butylalkohol und 2 N Essigsäure (95:5)
Systemtauglichkeit
Eignungsanforderungen: Das Chromatogramm der Systemeignungslösung weist zwei deutlich getrennte Flecken auf.
Analyse
Beispiele: Systemeignungslösung, Standardlösung und Beispiellösung.
Nachdem Sie die Platte an der Luft getrocknet haben, sprühen Sie sie mit Sprühreagenz ein und erhitzen Sie sie 15 Minuten lang auf 100 bis 105 °C. Untersuchen Sie die Platte unter weißem Licht.
Akzeptanzkriterien: Jeder sekundäre Fleck der Probenlösung ist nicht größer oder intensiver als der Hauptfleck der Standardlösung.
Einzelne Verunreinigungen: NMT 0,5 %
Gesamtverunreinigungen: NMT 2,0 %
SPEZIFISCHE TESTS
OPTISCHE ROTATION, Spezifische Rotation<781S>
Probenlösung: 110 mg/ml in 6 N Salzsäure
Akzeptanzkriterien: +12,6° bis +14,0°
PH<791>
Probenlösung: 20 mg/ml Lösung
Akzeptanzkriterien: 7,0~8,5
VERLUST BEIM TROCKNEN<731>: Trocknen Sie eine Probe 3 Stunden lang bei 105℃: Sie verliert NMT um 0,2 % ihres Gewichts.
ZUSÄTZLICHE ANFORDERUNGEN
VERPACKUNG UND LAGERUNG: In gut verschlossenen Behältern aufbewahren.
USP-REFERENZSTANDARDS<11>
USP L-Histidin RS
USP L-Proline RS