Cilastatin-Natrium
C16H25N2NaO5S 380,44
2-Heptensäure, 7-[(2-Amino-2-Carboxyethyl)thio]-2-[[(2,2-Dimethylcyclopropyl)carbonyl]amino]-, Mononatriumsalz, [R-[R*,S*-(Z)]]-.
Natrium (Z)-7-[[(R)-2-amino-2-carboxyethyl]thio]-2-[(S)-2,2-dimethylcyclopropancarboxamido]-2-heptenoat [81129-83-1].
» Cilastatin-Natrium enthält nicht weniger als 98,0 Prozent und nicht mehr als 101,5 Prozent C16H25N2NaO5S, berechnet auf wasserfreier und lösungsmittelfreier Basis.
Verpackung und Lagerung- In Behältern für sterile Feststoffe aufbewahren, wie unter Injektionen 1 beschrieben, und an einem kalten Ort aufbewahren.
Beschriftung- Wenn es zur Herstellung injizierbarer Dosierungsformen verwendet werden soll, ist auf dem Etikett angegeben, dass es steril ist.
USP-Referenzstandards<11>-
USP Cilastatin Ammoniumsalz RS
USP Endotoxin RS
Identifikation-
A: Die Retentionszeit des Hauptpeaks für Cilastatin im Chromatogramm der Testlösung, wie sie im Test auf chromatographische Reinheit erhalten wurde, entspricht der im Chromatogramm einer ähnlichen Zubereitung von USP Cilastatin Ammonium Salt RS.
B: Eine kleine Portion davon auf einem Platindraht in einer nicht leuchtenden Flamme entzünden: Die Flamme erhält eine intensive gelbe Farbe.
Spezifische Drehung<781S>: zwischen +41,5 und +44,5, auf wasserfreier und lösungsmittelfreier Basis.
Testlösung: 10 mg pro ml, in einer Mischung aus Methanol und Salzsäure (120:1).
Bakterielle Endotoxine<85>- Wenn auf dem Etikett angegeben ist, dass Cilastatin-Natrium steril ist, enthält es nicht mehr als 0,17 USP-Endotoxin-Einheiten pro mg Cilastatin.
Sterilität<71>- Wenn auf dem Etikett angegeben ist, dass Cilastatin-Natrium steril ist, erfüllt es die Anforderungen, wenn es gemäß den Anweisungen für die Membranfiltration im Rahmen der Prüfung auf Sterilität des zu untersuchenden Produkts getestet wird, wobei 6 g der Probe, gelöst in 200 ml Flüssigkeit A, verwendet werden.
pH<791>: zwischen 6,5 und 7,5, in einer Lösung (1 zu 100).
Wasser, Methode I<921>: nicht mehr als 2,0 %.
Schwermetalle, Methode II<231>: 0,002 %.
Grenzwert für Lösungsmittel-
Interne Standardlösung- Übertragen Sie 0,5 ml n-Propylalkohol in einen 1000-ml-Messkolben, verdünnen Sie mit Wasser auf das Volumen und mischen Sie.
Standardlösung- Übertragen Sie 2,0 ml Aceton, 0,50 ml Methanol und 0,50 ml Mesityloxid in einen 1000-ml-Messkolben, verdünnen Sie mit Wasser auf das Volumen und mischen Sie. Übertragen Sie 2,0 ml dieser Lösung und 2,0 ml der internen Standardlösung in einen 10-ml-Messkolben, verdünnen Sie mit Wasser auf das Volumen und mischen Sie. Diese Lösung enthält 316 µg Aceton, 79 µg Methanol und 86 µg Mesityloxid pro ml.
Testlösung- Übertragen Sie etwa 200 mg Cilastatin-Natrium, genau abgewogen, in einen 10-ml-Messkolben, geben Sie 2,0 ml interne Standardlösung und etwa 5 ml Wasser hinzu und lösen Sie es durch Schütteln auf. Mit Wasser auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)-Der Gaschromatograph ist mit einem Flammenionisationsdetektor und einer 0,53-mm × 30-m großen Kapillarsäule ausgestattet, deren Innenwand mit einem 1,0-µm dicken Film der flüssigen Phase G16 beschichtet ist. Die Säulentemperatur wird 2,5 Minuten lang bei 50 °C gehalten, dann mit einer Geschwindigkeit von 8 °C pro Minute auf 70 °C erhöht und 0,5 Minuten lang bei 70 °C gehalten; die Temperatur der Einspritzöffnung wird bei 160 °C gehalten; die Detektortemperatur wird auf 250 °C gehalten; Als Trägergas wird Helium mit einer Durchflussrate von etwa 9 ml pro Minute verwendet. Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen wie für das Verfahren angegeben auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,26 für Aceton, 0,35 für Methanol, 0,67 für n-Propylalkohol und 1,0 für Mesityloxid; und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen, bestimmt aus den Peakflächenverhältnissen jedes Analyten zu n-Propylalkohol, beträgt nicht mehr als 5,0 %.
Verfahren-Injizieren Sie gleiche Volumina (ca. 1 µL) der Standardlösung und der Testlösung getrennt in den Chromatographen, indem Sie die Lösungsmittelspültechnik (Wasser) verwenden. Zeichnen Sie die Chromatogramme auf. und messen Sie die Flächen für die Aceton-, Methanol-, n-Propylalkohol- und Mesityloxid-Peaks. Berechnen Sie die prozentualen Anteile von Aceton, Methanol und Mesityloxid im Cilastatin-Natrium anhand der Formel:
(C/W)(RU / RS)
wobei C die Konzentration des entsprechenden Analyten in der Standardlösung in µg pro ml ist; W ist die Menge (in mg) Cilastatin-Natrium, die zur Herstellung der Testlösung verwendet wird; und RU und RS sind die Peakflächenverhältnisse des entsprechenden Analyten zu n-Propylalkohol, erhalten aus der Testlösung bzw. der Standardlösung. Es werden nicht mehr als 1,0 % Aceton gefunden; es werden nicht mehr als 0,5 % Methanol gefunden; und es werden nicht mehr als 0,4 % Mesityloxid gefunden.
Chromatographische Reinheit-
Lösungsmittel- Verwenden Sie Wasser.
Lösung A- Bereiten Sie eine Mischung aus verdünnter Phosphorsäure (1 zu 1000) und Acetonitril (700:300) vor, passieren Sie sie durch einen Filter mit einer Porosität von 0,5 µm oder feiner und entgasen Sie.
Lösung B- Verwenden Sie verdünnte Phosphorsäure (1 zu 1000). Durch einen Filter mit einer Porosität von 0,5 µm oder feiner passieren und entgasen.
Mobile Phase- Verwenden Sie variable Mischungen von Lösung A und Lösung B gemäß den Anweisungen für das chromatographische System. Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie<621>).
Testlösung- Bereiten Sie eine Lösung von Cilastatin-Natrium in Lösungsmittel mit einer Konzentration von etwa 1,6 mg pro ml vor.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie<621>)-Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 210-nm-Detektor und einer 4,5 mm × 25 cm großen Säule mit Packung L1 ausgestattet. Die Säule wird auf einer konstanten Temperatur von etwa 50 °C gehalten. Die Durchflussrate beträgt etwa 2 ml pro Minute. Der Chromatograph wird wie folgt programmiert.
Zeit
(Minuten) Lösung A
(%) Lösung B
(%) Elution
0 15 85 Gleichgewicht
0-30 15®100 85®0 linearer GradientChromatographieren Sie die Testlösung und messen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren: Der Kapazitätsfaktor k¢ beträgt nicht weniger als 10; die aus dem Cilastatin-Peak ermittelte Säuleneffizienz beträgt nicht weniger als 3000 theoretische Böden; und der Tailing-Faktor beträgt nicht mehr als 4,5.
Vorgehensweise- Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 20 µL) der Testlösung und des Lösungsmittels in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen der Peaks. Berechnen Sie die chromatographische Reinheit des Cilastatin-Natriumanteils in Prozent anhand der Formel:
100rC / (rT rB rA)
wobei rC die Fläche des Cilastatin-Peaks ist, der aus der Testlösung erhalten wurde; rT ist die Summe der Flächen aller Peaks, die aus der Testlösung erhalten wurden; rB ist die Summe der Flächen aller vom Lösungsmittel erhaltenen Peaks; und rA ist die Reaktion des Peaks, falls vorhanden, nicht zurückgehaltener Substanzen, wie z. B. Aceton, an der Lösungsmittelfront, die aus der Testlösung erhalten wird: Es werden nicht weniger als 98,5 % gefunden. Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung in der Menge an Cilastatin-Natrium anhand der Formel:
100ri / (rT rB rA)
wobei ri die Peakfläche für jede Verunreinigung im aus der Testlösung erhaltenen Chromatogramm ist und die anderen Begriffe wie oben definiert sind: Es werden nicht mehr als 0,5 % einer einzelnen Verunreinigung gefunden.
Test- Übertragen Sie etwa 300 mg Cilastatin-Natrium, genau abgewogen, in ein geeignetes Becherglas, geben Sie 30 ml Methanol hinzu und lösen Sie es durch Schwenken auf. 5 ml Wasser hinzufügen und potentiometrisch mit 0,1 N Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 3 titrieren. Anschließend mit 0,1 N Natriumhydroxid titrieren, bis drei Wendepunkte beobachtet wurden. Berechnen Sie die Titerdifferenz in ml zwischen dem ersten und dritten Wendepunkt. Jeder ml 0,1 N Natriumhydroxid entspricht 19,022 mg C16H25N2NaO5S.