Cholinchlorid
C5H14ClNO 139,62
(2-Hydroxyethyl)trimethylammoniumchlorid;
2-Hydroxy-N,N,N-Trimethylethanaminiumchlorid [67-48-1].
DEFINITION
Cholinchlorid enthält NLT 99,0 % und NMT 100,5 % Cholinchlorid (C5H14ClNO), berechnet auf wasserfreier Basis.
IDENTIFIZIERUNG
• A. Infrarotabsorption<197K>
• B. Identifizierungstests-Allgemein, Chlorid<191>: Eine Lösung (1 von 20) erfüllt die Anforderungen.
TEST
• Vorgehensweise
Probe: 120 mg
Titrimetrisches System
(Siehe Titrimetrie<541>.)
Modus: Direkte Titration
Titriermittel: 0,1 N Silbernitrat VS
Endpunkterkennung: Potentiometrisch
Leerwert: 35 ml Wasser. 3 Tropfen Essigsäure hinzufügen.
Analyse: Lösen Sie die Probe in 35 ml Wasser und geben Sie 3 Tropfen Essigsäure hinzu. Mit Titriermittel titrieren.
Berechnen Sie den Prozentsatz an Cholinchlorid (C5H14ClNO) in der entnommenen Probe:
Ergebnis = [(V B) × N × F × 100]/W
V = Volumen des Probentitriermittels (ml)
B = Blindvolumen des Titriermittels (ml)
N = Titriermittelnormalität (mEq/ml)
F = Äquivalenzfaktor, 139,6 mg/mÄq
W = Gewicht der Probe (mg)
Akzeptanzkriterien: 99,0 % - 100,5 % auf wasserfreier Basis
VERUNREINIGUNGEN
• Restlösungsmittel<467>: Erfüllt die Anforderungen, mit der Ausnahme, dass der Grenzwert für 1,4-Dioxan 10 µg/g beträgt
• Rückstände bei der Zündung<281>: NMT 0,05 %
• Arsen, Methode I<211>
Analyse: 30 ml Wasser und 5 ml Salzsäure hinzufügen, um die Probe aufzulösen.
Akzeptanzkriterien: NMT 2 ppm
• Leitung<251>
[Hinweis-Verwenden Sie Methylenchlorid anstelle von Chloroform, um die Dithizon-Extraktionslösung und die Standard-Dithizon-Lösung herzustellen. ]
Lösung A: Geben Sie 8,4 g Natriumhydroxidlösung (1 zu 2) in eine Plastikflasche, geben Sie 100 ml Ammoniumhydroxid hinzu und mischen Sie.
Standardlösung: Übertragen Sie 1,0 ml der verdünnten Standard-Bleilösung in einen Scheidetrichter mit 25,0 ml Wasser.
Probenlösung: Lösen Sie 3,00 g Cholinchlorid in einem Scheidetrichter mit 25,0 ml Wasser.
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Geben Sie getrennt 6,0 ml Ammoniumcitratlösung und 3,0 ml Kaliumcyanidlösung zur Standardlösung und zur Probenlösung hinzu. Extrahieren Sie jede der resultierenden Lösungen dreimal mit 5,0 ml-Portionen der Dithizon-Extraktionslösung, schütteln Sie sie 60 Sekunden lang und lassen Sie jeden Extrakt in einen anderen Separator abtropfen. Schütteln Sie die kombinierten Dithizonlösungen 30 s lang mit 20,0 ml Salpetersäure (1 zu 100) und verwerfen Sie die Methylenchloridschicht. 6,0 ml Ammoniak-Cyanid-Lösung, 2 ml Lösung A und 10 ml Standard-Dithizon-Lösung hinzufügen und 45 s lang schütteln. Lassen Sie die Phasen trennen und messen Sie die Absorption der unteren Schicht bei 510 nm mit einem geeigneten Spektrophotometer.
Akzeptanzkriterien: Die Absorption der Probenlösung ist NMT die Absorption der Standardlösung (NMT 0,3 ppm).
• Schwermetalle, Methode II<231>: NMT 10 ppm
• Grenzwert der gesamten Amine
Standardlösung: 500 µg/ml Trimethylaminhydrochlorid in Wasser
Probenlösung: Übertragen Sie 10,0 g Cholinchlorid in ein Becherglas mit einem kunststoffbeschichteten Rührstab, geben Sie 170 ml Wasser und 30,0 ml Natriumhydroxid TS hinzu und rühren Sie, bis es sich aufgelöst hat.
Stammlösung für Systemeignung: 10 µg/ml Trimethylaminhydrochlorid in Wasser
Systemeignungslösung: 10,0 ml der Systemeignungsstammlösung in ein Becherglas mit einem kunststoffbeschichteten Rührstab geben, 160 ml Wasser und 30,0 ml Natriumhydroxid TS hinzufügen und rühren, bis es aufgelöst ist.
Elektrodensystem: Verwenden Sie eine gasempfindliche, ammoniakspezifische Anzeigeelektrode mit interner Referenz, die an ein pH-Meter angeschlossen ist, das Potentiale mit einer Reproduzierbarkeit von mindestens ±0,1 mV messen kann (siehe pH 791).
Standardantwortlinie: Mischen Sie 30,0 ml Natriumhydroxid TS und 170 ml Wasser. Fügen Sie einen mit Kunststoff beschichteten Rührstab hinzu, führen Sie die Elektrode in die Lösung ein und zeichnen Sie das Potential in mV auf. Rühren Sie weiter und fügen Sie in Abständen von 5 Minuten 0,200, 0,600, 1,00 und 2,00 ml Standardlösung hinzu und notieren Sie das Potenzial nach jeder Zugabe. Zeichnen Sie die Logarithmen der kumulativen Trimethylaminhydrochlorid-Konzentrationen (0,50, 1,50, 2,50 und 5,00 µg/ml) gegen das Potenzial in mV auf und bestimmen Sie die Steigung (S) der Standard-Antwortlinie für die Elektrode.
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
Gehen Sie wie in der Analyse beschrieben vor, ersetzen Sie jedoch die Probenlösung durch die Systemeignungslösung und ersetzen Sie in der Formel unten W durch V, was 10 ml entspricht.
Eignungsanforderungen: Die Gesamtänderung beträgt NLT 10 mV für eine kumulative Zugabe von 0,4 ml der Standardlösung; die gefundene Menge an Trimethylaminhydrochlorid beträgt 8,5-11,5 µg/L.
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Spülen Sie die Elektrode ab, tauchen Sie sie in die Probenlösung ein, rühren Sie um und zeichnen Sie das Potential in mV auf. Fügen Sie 0,100 ml der Standardlösung hinzu und notieren Sie das Potenzial. Fügen Sie weitere 0,100 ml der Standardlösung hinzu und notieren Sie das Potenzial. [Hinweis: Wenn die Gesamtänderung nach der zweiten Zugabe der Standardlösung weniger als 10 mV beträgt, fügen Sie ein drittes Aliquot von 0,200 ml hinzu.]
Berechnen Sie den Gehalt an Gesamtaminen als Trimethylaminhydrochlorid in der entnommenen Probe in µg/g:
Ergebnis = (CS × VA)/[(F 1) × W]
CS = Konzentration der Standardlösung (µg/ml)
VA = Gesamtvolumen der zur Probenlösung hinzugefügten Standardlösung (ml)
W = Gewicht des zur Herstellung der Probenlösung entnommenen Cholinchlorids (g)
F = Korrekturfaktor, berechnet nach der Formel:
F = Antilog [(mVF mV0)/S]
mVF = endgültiger Messwert nach Zugabe der Standardlösung (mV)
mV0 = Anfangswert der Probenlösung (mV)
S = Steigung der Standard-Antwortlinie für die Elektrode
Akzeptanzkriterien: NMT 10 µg/g
• Chromatografische Reinheit
Pufferlösung: 7,1 g/L wasserfreies dibasisches Natriumphosphat. Mit Phosphorsäure einen pH-Wert von 2,5 einstellen.
Mobile Phase: Pufferlösung und Acetonitril (7:3)
Standardlösung: Übertragen Sie eine Menge (NMT 100 mg) USP-Cholinchlorid RS in ein 24-ml-Fläschchen mit Schraubverschluss und geben Sie 400 mg 3,5-Dinitrobenzoylchlorid und 10 ml Acetonitril hinzu. Verschließen Sie das Fläschchen, erhitzen Sie es auf 55 °C und erhitzen Sie es weitere 2 Stunden lang. Auf Raumtemperatur abkühlen lassen und 5 ml Wasser hinzufügen. 5 Min. stehen lassen. Übertragen Sie die Lösung quantitativ in einen 25-ml-Messkolben und verdünnen Sie sie mit Acetonitril auf das Volumen. Verdünnen Sie ein Volumen dieser Lösung mit der mobilen Phase, um eine Konzentration von 2,0 µg/ml USP-Cholinchlorid RS zu erhalten.
Probenlösung: Übertragen Sie 110 mg Cholinchlorid in ein 24-ml-Fläschchen mit Schraubverschluss. 2 Stunden bei 120 °C trocknen. 400 mg 3,5-Dinitrobenzoylchlorid und 10 ml Acetonitril hinzufügen. Verschließen Sie das Fläschchen, erhitzen Sie es auf 55 °C und erhitzen Sie es weitere 2 Stunden lang. Auf Raumtemperatur abkühlen lassen und 5 ml Wasser hinzufügen. 5 Min. stehen lassen. Übertragen Sie die Lösung quantitativ in einen 50-ml-Messkolben und verdünnen Sie sie mit der mobilen Phase auf das Volumen. Pipettieren Sie 2,0 ml der Lösung in einen 25-ml-Messkolben und verdünnen Sie mit der mobilen Phase auf das Volumen.
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie<621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 208 nm
Säule: 4,6 mm × 25 cm; Verpackung L7
Säulentemperatur: 30
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße: 20 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Standardlösung
Eignungsanforderungen
Kapazitätsfaktor (k'): NLT 2
Relative Standardabweichung: NMT 5 %, bestimmt aus dem Cholinderivat-Peak
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung in der entnommenen Portion Cholinchlorid:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = Peak-Reaktion für jede Verunreinigung, mit Ausnahme des Cholinderivats und der 3,5-Dinitrobenzoesäure aus der Probenlösung
rS = Peak-Reaktion für das Cholin-Derivat aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP-Cholinchlorid RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Cholinchlorid in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien
Einzelne Verunreinigungen: NMT 0,3 %
Gesamtverunreinigungen: NMT 2,0 %
SPEZIFISCHE TESTS
• pH<791>: 4,0-7,0, in einer Lösung (1 von 10)
• Wasserbestimmung, Methode I<921>: NMT 0,5 %
ZUSÄTZLICHE ANFORDERUNGEN
• Verpackung und Lagerung: In gut verschlossenen Behältern aufbewahren.
• USP-Referenzstandards<11>
USP Cholinchlorid RS