Bethanecholchlorid
C7H17ClN2O2 196,67
1-Propanaminium, 2-(Aminocarbonyl)oxy-N,N,N-Trimethyl-, Chlorid, (±)-.
(±)-(2-Hydroxypropyl)trimethylammoniumchloridcarbamat [590-63-6].
» Bethanecholchlorid enthält nicht weniger als 98,0 Prozent und nicht mehr als 101,5 Prozent C7H17ClN2O2, berechnet auf der Trockenbasis.
Verpackung und Lagerung- In dichten Behältern aufbewahren.
USP-Referenzstandards<11>-
USP Bethanecholchlorid RS
Identifikation-
A: Infrarotabsorption<197M>.
B: Etwa 50 mg in 2 ml Wasser auflösen, 0,1 ml Kobaltchloridlösung (1 zu 100) hinzufügen und dann 0,1 ml Kaliumferrocyanid TS hinzufügen: Es entsteht eine smaragdgrüne Farbe, die in 5 bis 10 Minuten fast vollständig verblasst (Unterschied zu Cholinchlorid, das die gleiche Reaktion hervorruft, die Farbe jedoch nicht verblasst).
C: Zu 1 ml einer Lösung (1 zu 100) 0,1 ml Jod TS hinzufügen: Es bildet sich ein brauner Niederschlag, der sich schnell in eine dunkle olivgrüne Farbe ändert.
D: Eine Lösung davon reagiert auf die Tests auf Chlorid<191>.
pH<791>: zwischen 5,5 und 6,5, in einer Lösung (1 zu 100).
Trocknungsverlust<731>- Trocknen Sie es 2 Stunden lang bei 105 °C: Es verliert nicht mehr als 1,0 % seines Gewichts.
Glührückstand<281>: nicht mehr als 0,1 %.
Schwermetalle, Methode I<231>- Lösen Sie 667 mg in 10 ml Wasser, geben Sie 2 ml 1 N Essigsäure hinzu und verdünnen Sie mit Wasser auf 25 ml: Der Grenzwert liegt bei 0,003 %.
Chloridgehalt- Lösen Sie etwa 400 mg, die zuvor getrocknet und genau abgewogen wurden, in 30 ml Wasser auf. Fügen Sie 40,0 ml 0,1 N Silbernitrat VS hinzu, fügen Sie dann 3 ml Salpetersäure und 5 ml Nitrobenzol hinzu, schütteln Sie einige Minuten lang, geben Sie 2 ml Eisen(III)-Ammoniumsulfat TS hinzu und titrieren Sie das überschüssige Silbernitrat mit 0,1 N Ammoniumthiocyanat VS. Jeder ml 0,1 N Silbernitrat entspricht 3,545 mg Cl: Der Cl-Gehalt liegt zwischen 17,7 % und 18,3 %.
Verwandte Verbindungen-
Pufferlösung- Übertragen Sie etwa 0,48 g Methansulfonsäure in einen 1000-ml-Messkolben. In Wasser auflösen und bis zum Volumen verdünnen.
Mobile Phase- Bereiten Sie eine gefilterte und entgaste Mischung aus Pufferlösung und Acetonitril (95:5) vor. Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie<621>).
Standardlösung- Lösen Sie eine genau abgewogene Menge USP-Bethanecholchlorid RS in der mobilen Phase und verdünnen Sie diese quantitativ und bei Bedarf schrittweise mit der mobilen Phase, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 1 µg USP-Bethanecholchlorid RS pro ml zu erhalten.
Testlösung- Übertragen Sie etwa 25 mg genau abgewogenes Bethanecholchlorid in einen 250-ml-Messkolben. In der mobilen Phase auflösen und auf das Volumen verdünnen und mischen.
Systemgerechte Lösung- Übertragen Sie etwa 25 mg genau abgewogenes Bethanecholchlorid in einen 250-ml-Messkolben. 10 ml 0,1 N Natriumhydroxid hinzufügen und etwa 15 Minuten stehen lassen. 10 ml 0,1 N Salzsäure hinzufügen. In der mobilen Phase auflösen und auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatographiesystem (siehe Chromatographie<621>)- Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem Leitfähigkeitsdetektor und einem 3,9- ausgestattet × 150 mm Kolonne mit Packung L55. Die Flussrate beträgt etwa 1,0 ml pro Minute. Die Detektor- und Säulentemperaturen werden bei 35 bzw. 30 °C gehalten. Chromatographieren Sie die für das System geeignete Lösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relative Retentionszeit beträgt etwa 0,9 für 2-Hydroxypropyltrimethylammoniumchlorid und 1,0 für Bethanechol; die Auflösung R zwischen 2-Hydroxypropyltrimethylammoniumchlorid und Bethanechol beträgt nicht weniger als 0,8. Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 10,0 % für Bethanecholchlorid.
Vorgehensweise- Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 50 µL) der mobilen Phase, der Standardlösung und der Testlösung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Peak-Antworten für alle Peaks. Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung im Anteil von Bethanecholchlorid anhand der Formel:
25.000 °C (F/W) (ri / rS)
wobei C die Konzentration von USP Bethanecholchlorid RS in der Standardlösung in mg pro ml ist; F ist der relative Reaktionsfaktor und beträgt 0,79 für 2-Hydroxypropyltrimethylammoniumchlorid und 1,0 für jede andere Verunreinigung; W ist das Gewicht in mg Bethanecholchlorid, das zur Herstellung der Testlösung verwendet wurde; ri ist die Spitzenreaktion für jede Verunreinigung in der Testlösung; und rS ist die Spitzenreaktion von USP Bethanecholchlorid RS in der Standardlösung. Es werden nicht mehr als 1,0 % 2-Hydroxypropyltrimethylammonium gefunden; es werden nicht mehr als 0,1 % sonstiger Verunreinigungen gefunden; und die Summe aller Verunreinigungen beträgt nicht mehr als 1,5 %.
Test-
Pufferlösung- Übertragen Sie etwa 29 mg Edetinsäure in einen 1000-ml-Messkolben und lösen Sie ihn in 500 ml Wasser auf. 300 µL Salpetersäure in den Messkolben geben und mit Wasser auf das Volumen verdünnen. Durch einen 0,45 µm Nylonmembranfilter laufen lassen.
Mobile Phase- Bereiten Sie eine gefilterte und entgaste Mischung aus Pufferlösung und Acetonitril (95:5) vor. Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie<621>).
Systemgerechte Lösung- Übertragen Sie etwa 25 mg genau abgewogenes Bethanecholchlorid in einen 250-ml-Messkolben. 10 ml 0,1 N Natriumhydroxid hinzufügen und etwa 15 Minuten stehen lassen. 10 ml 0,1 N Salzsäure hinzufügen. In der mobilen Phase auflösen und auf das Volumen verdünnen und mischen.
Standardvorbereitung- Lösen Sie eine genau abgewogene Menge USP-Bethanecholchlorid RS in der mobilen Phase und verdünnen Sie diese quantitativ und bei Bedarf schrittweise mit der mobilen Phase, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 0,1 mg USP-Bethanecholchlorid RS pro ml zu erhalten.
Assay-Vorbereitung- Übertragen Sie etwa 25 mg genau abgewogenes Bethanecholchlorid in einen 250-ml-Messkolben. In der mobilen Phase auflösen und auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)- Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem Leitfähigkeitsdetektor und einem 3,9- ausgestattet × 150 mm Kolonne mit Packung L55. Die Flussrate beträgt etwa 1,0 ml pro Minute. Die Detektor- und Säulentemperaturen werden bei 35 bzw. 30 °C gehalten. Chromatographieren Sie die für das System geeignete Lösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,9 für 2-Hydroxypropyltrimethylammoniumchlorid und 1,0 für Bethanechol; und die Auflösung R zwischen 2-Hydroxypropyltrimethylammoniumchlorid und Bethanechol beträgt nicht weniger als 0,8. Chromatographieren Sie das Standardpräparat und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Der Tailing-Faktor beträgt nicht mehr als 3,5; und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 3,0 %.
Vorgehensweise- Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 25 µL) der Standardzubereitung und der Testzubereitung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Peak-Reaktionen. Berechnen Sie die Menge (in mg) an C7H17ClN2O2 in der Portion Bethanecholchlorid anhand der Formel:
250 °C (rU / rS)
wobei C die Konzentration von USP Bethanecholchlorid RS in der Standardzubereitung in mg pro ml ist; und rU und rS sind die Bethanecholchlorid-Peak-Antworten, die von der Testvorbereitung bzw. der Standardvorbereitung erhalten wurden.