Aminosalicylsäure
C7H7NO3 153,14
Benzoesäure, 4-Amino-2-Hydroxy-.
4-Aminosalicylsäure [65-49-6].
» Aminosalicylsäure enthält nicht weniger als 98,5 Prozent und nicht mehr als 100,5 Prozent C7H7NO3, berechnet auf wasserfreier Basis.
[Achtung-Verwenden Sie unter keinen Umständen eine aus Aminosalicylsäure hergestellte Lösung, deren Farbe dunkler ist als die einer frisch zubereiteten Lösung.]
Verpackung und Lagerung- In dichten, lichtbeständigen Behältern bei einer Temperatur von nicht mehr als 30 °C aufbewahren.
USP-Referenzstandards<11>-
USP Aminosalicylsäure RS
USP m-Aminophenol RS
Klarheit und Farbe der Lösung- Ein g löst sich in 10 ml Natriumbicarbonatlösung (1 zu 15) und bildet eine klare Lösung, die nur eine schwache gelbe Farbe aufweist. Ein g löst sich in einer frisch zubereiteten Mischung aus 5 ml Salpetersäure und 45 ml Wasser auf, um eine klare Lösung zu bilden, die nur eine leichte Farbe aufweist.
Identifikation-
A: 0,25 g in 3 ml 1 N Natriumhydroxid auflösen, in einen 500 ml-Messkolben überführen, mit Wasser auf das Volumen verdünnen und mischen. Übertragen Sie ein 5-ml-Aliquot in einen 250-ml-Messkolben mit 12,5 ml Phosphatpuffer pH 7 (siehe Pufferlösungen im Abschnitt Reagenzien, Indikatoren und Lösungen), verdünnen Sie es mit Wasser auf das Volumen und mischen Sie. Wenn diese Lösung in einem geeigneten Spektrophotometer mit einem Blindwert desselben Puffers in derselben Konzentration verglichen wird, weist sie Absorptionsmaxima bei 265 ± 2 und 299 ± 2 nm auf, und das Verhältnis A265/A299 liegt zwischen 1,50 und 1,56.
B: Etwa 1 g in einen kleinen Rundkolben geben und 10 ml Essigsäureanhydrid hinzufügen. Den Kolben 30 Minuten lang auf einem Dampfbad erhitzen, 40 ml Wasser hinzufügen, mischen, filtrieren, abkühlen lassen und stehen lassen, bis das Diacetylderivat kristallisiert ist. Sammeln Sie den Niederschlag auf einem Filter, waschen Sie ihn gut mit Wasser und trocknen Sie ihn 1 Stunde lang bei 105 °C: Das so erhaltene Diacetylderivat schmilzt zwischen 191 und 197 °C.
C: 0,1 g mit 10 ml Wasser schütteln und filtrieren. Zu 5 ml des Filtrats 1 Tropfen Eisenchlorid TS hinzufügen: Es entsteht eine violette Farbe.
pH<791>: zwischen 3,0 und 3,7, in einer gesättigten Lösung.
Wasser, Methode I<921>: nicht mehr als 0,5 %.
Glührückstand<281>: nicht mehr als 0,2 %.
Chlorid<221>- Lösen Sie 0,50 g in einer Mischung aus 5 ml Salpetersäure und 15 ml Wasser: Die Lösung weist nicht mehr Chlorid auf, als 0,30 ml 0,020 N Salzsäure (0,042 %) entspricht.
Schwermetalle, Methode II 231: 0,003 %.
Grenzwert von m-Aminophenol-
Mobile Phase- Bereiten Sie es wie im Test beschrieben vor.
Interne Standardlösung- Bereiten Sie eine Lösung von Sulfanilamid in der mobilen Phase mit einer Konzentration von etwa 5 µg pro ml vor.
Standardlösung- Lösen Sie eine genau abgewogene Menge USP m-Aminophenol RS in der mobilen Phase auf, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 12 µg pro ml zu erhalten. Übertragen Sie 10,0 ml dieser Lösung und 10,0 ml der internen Standardlösung in einen 100-ml-Messkolben mit niedrigem Aktingehalt, verdünnen Sie mit der mobilen Phase auf das Volumen und mischen Sie.
Testlösung- Übertragen Sie etwa 50 mg genau abgewogene Aminosalicylsäure in einen 100-ml-Messkolben mit niedrigem aktinischem Gehalt, geben Sie 50 ml mobile Phase hinzu und schwenken Sie, um sie aufzulösen. 10,0 ml interne Standardlösung hinzufügen, mit der mobilen Phase auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie<621>)-Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 280-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 25 cm großen Säule ausgestattet, die eine 10 µm dicke Packung L1 enthält. Die Durchflussrate beträgt etwa 1,5 ml pro Minute. Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,66 für Sulfanilamid und 1,0 für m-Aminophenol; die Auflösung R zwischen m-Aminophenol und Sulfanilamid nicht weniger als 2,5 beträgt; und die relative Standardabweichung für Wiederholungsinjektionen beträgt nicht mehr als 7 %.
Vorgehensweise- [Hinweis-Waschen Sie die Säule nach der Verwendung 30 Minuten lang mit einer filtrierten und entgasten Mischung aus Methanol, Wasser und Phosphorsäure (77:23:0,6) und dann 30 Minuten lang mit einer filtrierten und entgasten Mischung aus Methanol und Wasser (50:50). ] Injizieren Sie gleiche Volumina (ca. 20 µL) der Standardlösung und der Testlösung getrennt in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Reaktionen für die Hauptpeaks. Berechnen Sie den Prozentsatz an m-Aminophenol im Verhältnis zur Menge an Aminosalicylsäure in der Portion Aminosalicylsäure anhand der Formel:
10(C/W)(RU/RS)
wobei C die Konzentration von USP m-Aminophenol RS in der Standardlösung in µg pro ml ist, W die Menge an Aminosalicylsäure in mg in der entnommenen Portion Aminosalicylsäure ist, wie im Test bestimmt; und RU und RS sind die Verhältnisse der Reaktion des m-Aminophenol-Peaks zur Reaktion des Sulfanilamid-Peaks, erhalten aus der Testlösung und der Standardlösung; bzw.: Es werden nicht mehr als 0,25 % m-Aminophenol gefunden.
Schwefelwasserstoff, Schwefeldioxid und Amylalkohol- Lösen Sie etwa 500 mg in 5 ml 1 N Natriumhydroxid, geben Sie 6 ml 3 N Salzsäure hinzu und rühren Sie kräftig um: Es ist kein Geruch von Schwefelwasserstoff oder Schwefeldioxid wahrnehmbar und höchstens ein schwacher Geruch von Amylalkoholen. Ein Stück angefeuchtetes Bleiacetat-Testpapier, das über die Mischung gehalten wird, verfärbt sich nicht.
Test-
Mobile Phase- Bereiten Sie eine Mischung aus 425 ml 0,05 M dibasischem Natriumphosphat, 425 ml 0,05 M monobasischem Natriumphosphat und 150 ml Methanol mit 1,9 g Tetrabutylammoniumhydroxid vor. Filtern und entgasen. Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie 621).
Interne Standardlösung- Bereiten Sie eine Lösung von Paracetamol in der mobilen Phase mit einer Konzentration von etwa 5 mg pro ml vor.
Standardvorbereitung- Übertragen Sie etwa 12,5 mg genau abgewogene USP-Aminosalicylsäure RS in einen 25-ml-Messkolben mit niedrigem aktinischem Gehalt, geben Sie 15 ml mobile Phase hinzu und schwenken Sie, um sie aufzulösen. 2,5 ml interne Standardlösung hinzufügen, mit der mobilen Phase auf das Volumen verdünnen und mischen.
Assay-Vorbereitung- Bereiten Sie es wie für die Standardzubereitung beschrieben vor, außer dass Sie Aminosalicylsäure anstelle von USP-Aminosalicylsäure RS verwenden.
Chromatographisches System (siehe Chromatographie<621>)-Der Chromatograph ist mit einem 254-nm-Detektor und einer 4,6-mm × 25-cm großen Säule ausgestattet, die die Packung L1 enthält. Die Durchflussrate beträgt etwa 1,5 ml pro Minute. Chromatographieren Sie das Standardpräparat und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,83 für Paracetamol und 1,0 für Aminosalicylsäure; die Auflösung R zwischen Aminosalicylsäure und Paracetamol beträgt nicht weniger als 1,7; und die relative Standardabweichung der Verhältnisse der Reaktion des Aminosalicylsäure-Peaks zur Reaktion des Paracetamol-Peaks beträgt nicht mehr als 1,0 %.
Vorgehensweise- [Hinweis-Waschen Sie die Säule nach der Verwendung 30 Minuten lang mit einer filtrierten und entgasten Mischung aus Methanol, Wasser und Phosphorsäure (77:23:0,6) und dann 30 Minuten lang mit einer filtrierten und entgasten Mischung aus Methanol und Wasser (50:50).] Injizieren Sie gleiche Volumina (ca. 20 µL) der Standardzubereitung und der Testzubereitung getrennt in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Reaktionen für die wichtigsten Gipfel. Berechnen Sie die Menge an C7H7NO3 in der Aminosalicylsäure in mg anhand der Formel:
25C (RU / RS)
wobei C die Konzentration der USP-Aminosalicylsäure RS in der Standardzubereitung in mg pro ml ist; und RU und RS sind die Verhältnisse der Reaktion des Aminosalicylsäure-Peaks zur Reaktion des Paracetamol-Peaks, die aus der Testzubereitung bzw. der Standardzubereitung erhalten wurden.